Evolução da técnica de PCR: sua contribuição no diagnóstico da infecção por HPV / Evolution of techinique PCR: its contribution to infection diagnosis by HPV

Introdução: a reação em cadeia da polimerase (PCR) é a técnica de biologia molecular mais utilizada na detecção viral, principalmente em situações onde a quantidade de DNA disponível é pequena. O papilomavírus humano (HPV) representa um dos mais graves problemas de saúde pública e está associado ao câncer do colo do útero, especialmente em países em desenvolvimento, como o Brasil, que desde 2009 já apresentava 40 mil novos casos por ano. Objetivo: descrever a evolução da PCR e sua contribuição no diagnóstico do HPV. Metodologia: realizou-se uma revisão de literatura a partir de publicações disponíveis em base de dados eletrônicos, como Science Direct, SciELO, Pubmed, Instituto Nacional do Câncer e Ministério da Saúde do Brasil, nos últimos cinco anos. Resultados: dentre as técnicas citadas nesta revisão de literatura, todas têm alta relevância na detecção de genotipagem do HPV, embora a escolha quanto ao melhor desempenho fique a critério do pesquisador. A técnica de Nested PCR demonstra ser a mais vantajosa na detecção do vírus, pelo fato de ter uma maior sensibilidade, em comparação com as demais. Conclusão: a técnica PCR possui alta sensibilidade (90-100%) e apresenta 92,8 a 100% de especificidade, sendo padrão ouro para a detecção de DNA do HPV, em amostras citológicas do câncer de colo do útero. Assim, os dados obtidos permitem constatar que a técnica PCR, utilizada para o rastreamento do HPV, é considerada padrão ouro, tendo maior sensibilidade, especificidade e velocidade de análise, devendo ser o método de escolha para o diagnóstico eficiente do HPV.

Introduction: polymerase chain reaction (PCR) is the most widely used molecular biology technique for viral detection, especially in situations where the amount of available DNA is small. Human papillomavirus (HPV) represents one of the most serious public health problems and is associated with cervical cancer, especially in developing countries such as Brazil that has had 40,000 (forty thousand) new cases a year, since 2009. Objective: to describe the evolution of PCR and its contribution to HPV diagnosis. Methodology: a literature review was conducted from publications available in electronic databases, such as Science Direct, SciELO, Pubmed, National Cancer Institute and Ministry of Health of Brazil, in the last five years. Results: among the techniques cited in this literature review, all have high relevance in the detection of HPV genotyping, although the choice for the best performance is at the discretion of the researcher. The Nested PCR technique proves to be the most advantageous in detecting the virus because it has a higher sensitivity compared to the others. Conclusion: the PCR technique has high sensitivity (90-100%) and presents 92.8 to 100% specificity, being the gold standard for the HPV DNA detection in cytology samples of uterus cervix cancer. Thus, the data obtained show that the PCR technique used for HPV screening is considered the gold standard, having greater sensitivity, specificity and speed of analysis, and should be the method of choice for the efficient diagnosis of HPV.

O papel do complexo principal de histocompatibilidade na fisiologia da gravidez e na patogênese de complicações obstétricas / Major histocompatibility complex: its role in the physiology of pregnancy and in the pathogenic mechanisms of obstetric complications

Este trabalho tem por objetivo discutir a estrutura e função dos Antígenos Leucocitários Humanos (HLA), seus métodos de detecção, nomenclatura e os mecanismos imunopatológicos que o associam com a fisiologia da gestação e morbidades obstétricas. Sabe-se que o equilíbrio imunológico entre mãe e concepto é imprescindível na manutenção da gravidez. Moléculas do HLA - notadamente o HLA-G expresso na interface materno-fetal - exercem função importante na tolerância imunológica materna, evitando rejeição fetal e algumas complicações obstétricas. Além disso, o HLA permeia diversas etapas do desenvolvimento conceptual como clivagem, formação do trofoblasto e implantação. Para revisão, foram pesquisados os bancos de dados MEDLINE e LILACS, utilizando os descritores: "HLA antigens"; "pregnancy"; "embryonic development"; "pregnancy complication"; "abortion, habitual"; "pre-eclampsia". O conhecimento sobre a influência do HLA na gravidez é necessário para melhor manejo da gestação e patologias obstétricas auto-imunes, favorecendo intervenções precoces e terapêutica específica, reduzindo a morbimortalidade materna e perinatal.

The aim of this paper is to review Human Histocompatibility Antigens (HLA) structure and function, its detection methods, nomenclature and pathogenic mechanisms associated with pregnancy physiology and obstetrics diseases. Immunological equilibrium between mother and conceptus is indispensable for the maintenance of pregnancy. Molecules from the HLA - mainly HLA-G expressed in the mother-fetus interface - fulfill an important function in maternal immune tolerance, contributing to avoid fetal rejection and obstetrical complications. In addition, HLA influences different stages of fetal development, such as embryonic cleavage, trophoblast, formation and implantation. For this review, were surveyed in the MEDLINE and LILACS databases, using the following keywords: "HLA antigens", "pregnancy", "embryonic development", "pregnancy complication", "abortion, habitual", "pre-eclampsia". Knowledge of the HLA role in pregnancy is necessary to improve pregnancy management and autoimmune obstetrical illnesses, by allowing early interventions and specific therapeutics to reduce maternal and perinatal morbidity and mortality.

Síndromes genéticas: uma causa de diabetes mellitus na infância e adolescência / Genetic syndromes: a cause of diabetes mellitus in infancy and adolescence

Muitas síndromes genéticas se associam ao desenvolvimento de diabetes mellitus, como resultado de resistência insulínica, insulinopenia e deficiências vitamínicas. Em algumas delas o diabetes está sempre presente, como nas síndromes de Wolfram, Wolcott-Rallison, Rogers, Donohue e Rabson-Mendehall. Em outras o diabetes, embora nem sempre esteja presente, está freqüentemente associado, como nas síndromes de Prader-Willi, Bardet-Biedl, Alstrõm, Turner, Down e Klinefelter. Apesar das manifestações clínicas serem bastante variadas, recomenda-se a investigação de síndromes genéticas em todo paciente com diabetes que apresente surdez neurossensorial, atrofia óptica, anemia megaloblástica, diabetes insipidus, história familiar materna de diabetes, alterações urinárias e respiratórias, distúrbios neurológicos, miopatias e dismorfias ao exame clínico. Também devem ser investigados os portadores de síndromes genéticas comumente associadas ao diabetes. A disponibilidade de testes genéticos, o diagnóstico pré-natal e a identificação precoce das complicações tratáveis associadas a estas síndromes justificam a revisão desse tema.

Frequency of celiac disease and its serological markers in patients with autoimmune hepatitis

Transglutaminase (anti-tTG) and anti-endomysial (AEA) antibodies were reported to occur in patients with autoimmune hepatitis (AIH) as well as in subjects with advanced cirrhosis, but the prevalence of celiac disease (CD) in patients with AIH is either negligible or unknown. The frequency of IgA anti-tTG and IgA AEA was determined in 64 patients (54 females, mean age 19[5-67] years ) with AIH diagnosed according to international criteria. Patients with positive or intermediate results for those antibodies were submitted to duodenal biopsy and HLA-DQ2 or DQ8 typing. Anti-tTG and AEA were detected in 6 (9 por cento) and one patient (1.6 por cento) with AIH, respectively. Positive and borderline results for IgA anti-tTG were detected, respectively, in two (3 por cento) and four (6 por cento) patients. Only one patient with HLA-DQ2 and IgA anti-tTG and IgA AEA had CD on duodenal biopsy. Two patients with either positive or borderline results for IgA anti-tTG antibody and HLA-DQ2 had normal histology on duodenal biopsy. IgA anti-tTG antibody and/or AEA were observed in 9% of AIH patients, but CD was confirmed in only one of them. The occurrence of IgA anti-tTG antibody in the other patients could be ascribed to the presence of chronic liver disease or to latent or potential CD.

Acompanhamento ambulatorial de crianças e adolescentes com diabetes melito tipo 1 na cidade de Salvador / Outpatient follow-up for children and adolescents with diabetes mellitus type 1 in the city of Salvador

Conhecer o perfil do acompanhamento ambulatorial de indivíduos com enfermidades crônicas como o diabetes melito tipo 1 (DM1) é importante para avaliar a qualidade do atendimento, identificar falhas e propor ações que visem a melhorar os serviços médicos prestados a essa população. Para isso, realizou-se estudo de corte transversal, aplicando um questionário a uma amostra de 71 crianças e adolescentes com DM1, acompanhadas em 3 ambulatórios de Endocrinologia Pediátrica na cidade de Salvador (BA), entre agosto a outubro de 2004. Os resultados demonstram dificuldades quanto ao satisfatório acompanhamento ambulatorial devido ao elevado custo financeiro do tratamento, escassez de equipes multidisciplinares, pouco conhecimento sobre aspectos importantes no cuidado da doença e inexistência de um laboratório central onde todos os exames possam ser realizados gratuitamente. Ao retratar as dificuldades encontradas no acompanhamento ambulatorial de crianças e adolescentes com DM1, este trabalho contribui para o planejamento de ações e desenvolvimento de estratégias com o objetivo de reduzir a morbi-mortalidade associada ao diabetes. Além disso, é essencial que as comunidades médica e leiga exijam políticas públicas de apoio e gratuidade para tratamento desta doença.

It is important to know the outpatient follow-up profile of individuals with chronic illnesses such as diabetes mellitus type I (DM1), to evaluate the quality of care, identify mistakes, and propose measures to improve the medical services offered to this population. To achieve these objectives, a cross-sectional study was performed using a survey with a sample of 71 children and teenagers with DM1, treated in three Pediatric Endocrinology clinics in Salvador, BA, from August to October 2004. The results demonstrate difficulties in achieving an optimal level of outpatient health care due to the high costs of treatment, shortage of multidisciplinary teams, poor knowledge regarding important aspects of treating the disease, and absence of a central laboratory where all the necessary exams could be performed free. The recognition of these factors will help to develop plans and strategies to reduce the morbidity and mortality rates of this disease. In addition, it is essential that the medical and social communities demand public policies to support and offer medical follow-ups at no costs to these patients.

Exposição ambiental a interferentes endócrinos com atividade estrogênica e sua associação com distúrbios puberais em crianças / Environmental exposure to endocrine disruptors with estrogenic activity and the association with pubertal disorders in children

A substância exógena que causa efeitos adversos na saúde de um organismo ou sua descendência, como resultado de distúrbios na função hormonal, é denominada interferente endócrino. Nos últimos anos, produtos ambientais com atividades hormonais têm sido documentados como causadores de anormalidades puberais ou reprodutivas em animais. Os poucos casos comprovados em humanos foram aqueles relacionados a exposições acidentais. Apesar disso, pediatras e pais recomendam a suspensão de todos os alimentos potencialmente contaminados, em especial carne (aves, gado) e derivados da soja quando a criança apresenta alguma alteração puberal. Estas recomendações, se não embasadas cientificamente, podem ter conseqüências deletérias, não apenas pela eliminação de fontes protéicas da dieta, como também por retardar a investigação de causas tratáveis. Por outro lado, a não investigação dos efeitos adversos destes produtos é da mesma forma danosa. Esta revisão descreve os principais interferentes endócrinos responsáveis por alterações puberais em humanos e conclui que, excetuando exposições acidentais a altas quantidades destes produtos, mais estudos são necessários para responsabilizar a ação crônica e em baixas doses destas substâncias na alteração do tempo de desenvolvimento puberal em nossa espécie.

Endocrine disruptors are exogenous substances with adverse health effects in intact organisms or their progeny, secondary to changes in endocrine function. Recent years have witnessed constant reports of environmental factors with hormone-like effects causing pubertal or reproductive abnormalities in animals. The few cases proven to be associated with pubertal disorders in humans have been related to accidental exposure. Nevertheless, pediatricians and parents recommend suspending all possible estrogen-contaminated food, especially meat (poultry, beef) and soy products, when the child presents with a pubertal disorder. These recommendations, if not scientifically sound, may have deleterious consequences by eliminating sources of dietary protein and possibly delaying the investigation of other potential and treatable causes. On the other hand, not investigating potential side effects of these products could have similar harmful effects. The current article describes the main endocrine disruptors associated with pubertal disorders in humans and concludes that except for accidental exposure to high doses, more research is needed on the effects of chronic and low-dose exposures in altering human pubertal development.

Influência dos antígenos de histocompatibilidade humanos na susceptibilidade e expressão clínica de doenças psiquiátricas / Influence of human histocompatibility antigens on susceptibility to and clinical expression of psychiatric diseases

A compreensão da base molecular das doenças é cada vez mais importante para seu diagnóstico, prevenção e tratamento. Localizado no braço curto do cromossomo 6, o sistema de histocompatibilidade humano - human leukocyte antigen (HLA) - participa da patogênese de algumas enfermidades psiquiátricas. O surgimento de métodos moleculares para tipificação dos alelos HLA e as recentes atualizações de sua nomenclatura têm contribuído para um melhor entendimento desse sistema. Infelizmente, essas informações não têm sido adequadamente veiculadas na literatura clínica. São objetivos desse trabalho: revisar a estrutura e função dos antígenos HLA, métodos de tipificação e nomenclatura atual e descrever seus mecanismos de associação com esquizofrenia, transtorno bipolar do humor e autismo. Foram pesquisados, através das bases de dados MEDLINE e LILACS, artigos publicados no período de 1995 a 2005, a fim de refletir o conhecimento mais recente sobre o assunto. Conclui-se que os antígenos de histocompatibilidade humanos influenciam o risco, quadro clínico e resposta terapêutica de algumas doenças psiquiátricas, mesmo não sendo eles os únicos atuantes no processo patológico. Embora o HLA tenha sido associado com esquizofrenia (HLA-DRB1*0101), autismo (HLA-DR4) e transtorno bipolar do humor (HLA de classe I), essas associações variam entre diferentes etnias e formas clínicas das doenças. A melhor definição de marcadores genéticos associados a distúrbios psiquiátricos é importante para elucidar possíveis mecanismos envolvidos na sua patogenia, estimar o risco individual de desenvolver essas doenças e contribuir para futuras intervenções profiláticas ou terapêuticas.

Understanding the molecular basis of diseases is increasingly more important for their diagnosis, prevention, and treatment. Located in the short arm of chromosome 6, the human histocompatibility system - human leukocyte antigens (HLA) - participates in the pathogenesis of some psychiatric disorders. Development of new molecular methods to typify HLA alleles and recent nomenclature updates have been contributing to a better understanding of this system. Unfortunately, this information has not been adequately disclosed in the medical literature. This article aims to review HLA structure, antigen function, detection methods, and current nomenclature, as well as to describe its association with schizophrenia, bipolar disorder, and autism. Articles published between 1995 and 2005 (to reflect the most recent knowledge of the subject) were searched in the MEDLINE and LILACS databases. It is concluded that HLA antigens influence risk, clinical status, and therapeutic response of some mental disorders, even if they do not act alone on these pathologic processes. Although HLA has been associated with schizophrenia (HLA-DRB1*0101), autism (HLA-DR4), and bipolar disorder (HLA class I), these associations vary across different ethnicities and clinical manifestations. The best definition of genetic markers associated with mental disorders is important to understand possible pathogenic mechanisms, predict individual risk of developing these diseases, and contribute to future prophylactic or therapeutic interventions.

Distribuição e freqüência de alelos e haplotipos HLA em brasileiros com diabetes melito tipo 1 / Distribution and frequency of HLA alleles and haplotypes in brazilians with type 1 diabetes mellitus

A predisposição genética ao diabetes melito tipo 1 (DM1) é associada a múltiplos genes do sistema de histocompatibilidade humano (HLA) de classe II. Em caucasianos, os antígenos HLA-DR3 e -DR4 são associados à susceptibilidade e o -DR2, à proteção. No Brasil, um país constituído por grande miscigenação entre caucasianos europeus, índios nativos e negros africanos, a base genética do DM1 tem sido pouco estudada. O objetivo desse trabalho foi apresentar uma revisão crítica dos artigos indexados nos bancos de dados MEDLINE e LILACS-BIREME sobre a associação do HLA com DM1 em brasileiros. Todos os oito estudos encontrados foram realizados no sudeste do país. A susceptibilidade imunogenética para o DM1 em brasileiros foi associada com os alelos HLA-DRB1*03, -DRB1*04, -DQB1*0201, -DQB1*0302 e a proteção com os alelos -DQB1*0602 e -DQB1*0301 e os antígenos -DR2 e -DR7. Por ser o Brasil constituído por grande miscigenação, não se pode extrapolar para todo o país estudos realizados em apenas uma região. Faz-se necessário pesquisar populações de várias regiões, analisando sua diversidade alélica para identificar novas associações ou reforçar aquelas já existentes. Esse conhecimento contribuirá para futuras intervenções profiláticas e terapêuticas nos grupos de brasileiros com maior risco de desenvolver DM1.

Associação do sistema de histocompatibilidade humano com doenças gastrintestinais / Human histocompatibility system association with gastrointestinal diseases

Fatores genéticos, imunológicos e ambientais estão envolvidos na patogênese de doenças gastrintestinais. Situado no braço curto do cromossomo 6, o sistema HLA se destaca pelo seu polimorfismo e capacidade de conferir susceptibilidade ou resistência a vários distúrbios imunomediados. De acordo com a patologia e, algumas vezes, com o grupo étnico-racial estudado, existem variações na associação HLA x doença. Acredita-se que moléculas de histocompatibilidade possam influenciar na idade de surgimento, resposta ao tratamento e no curso clínico de algumas enfermidades. O surgimento de novos métodos para tipificação dos alelos HLA assim como as mudanças em sua nomenclatura têm permitido um melhor entendimento desse sistema. Infelizmente, esse conhecimento não tem sido adequadamente veiculado na literatura clínica. Esta revisão tem porobjetivo abordar a estrutura e função do sistema HLA, seus métodos de detecção, nomenclatura e associação com doença celíaca, doença de Crohn, hepatite autoimune, pancreatite auto-imune e úlceras orais recorrentes.

Los factores genéticos, inmunológicos y ambientales están envueltos en la patogénesis de las enfermedades gastrointestinales. Situado en el brazo corto del cromosoma 6, el sistema HLA se destaca por su polimorfismo y capacidad de conferir susceptibilidad o resistencia a varios disturbios inmunomediados. De acuerdo con la patología y algunas veces con el grupo étnico-racial estudiado, existen variaciones en la asociación HLA yenfermedades. El surgimiento de nuevos métodos para tipificación de los alelos así como los cambios en su Nomenclatura ha permitido un mejor entendimiento de este sistema. Infelizmente, ese conocimiento no ha sido adecuadamente vehiculazado en la literatura clínica. Esta revisión tiene por objeto abordar la estructura y función del sistema HLA, sus métodos de detección, nomenclatura y asociación con la enfermedad celíaca, enfermedad de Crohn, hepatitis auto-inmune, pancreatitis auto-inmune y úlceras orales-recurrentes.

Genetic, immunological and environmental factors are involved in the pathogenesis of the gastrointestinal diseases. Situated on the short arm of the chromosome 6, the HLA system is very polymorphic and has the capacity to confer susceptibility or resistance to different diseases. The relationship HLA vs. disease differs with the disease and, sometimes, with the ethnic-racial group studied. Histocompatibility molecules could determine the age of onset, the treatment response and the clinical course for some diseases. The recent discovery of new methods to typify HLA alleles and the changes in its nomenclature has contributed to a better understanding of this system. Nevertheless, has not thoroughly widespread. The aim of this review is to discuss the HLA structure and function, methods of detection, nomenclature and its association with celiac disease, Crohn’s disease, autoimmune hepatitis, autoimmune pancreatitis and oral recurrent ulcers.

Immunogenetics and infectious diseases: special reference to the mayor histocompatibility complex

Many studies have tried to identify genetic markers for infectious diseases, some of them have focused on human leukocyte antigens (HLA). The products of HLA genes interact with surface-specific receptors of T lymphocytes, resulting in activation of the host's immune response. Association of bacterial, viral, parasitic and fungal infections with the host's HLA has been widely investigated. The type and strength of this association differs among distinct populations, as well as among racial and/or ethnic groups. The new molecular methods for the identification of the HLA alleles, and the resulting new nomenclature, have contributed to a better understanding of this system. Unfortunately, this information has not been adequately transmitted to clinicians, which hampers the understanding of the association between the HLA system and diseases. We revised relevant studies on the association of HLA genes with infectious diseases, demonstrating their importance in the pathogenic mechanisms, through increased susceptibility or protection against infections and their complications.

Antígenos de histocompatibilidade humanos e dermatologia: da pesquisa para a prática clínica / Human histocompatibility antigens and Dermatology: from research to clinical practice

A participação do sistema de histocompatibilidade humano (HLA: human leukocyte antigens) na patogênese das doenças auto-imunes é bem conhecida. Situado no braço curto do cromossomo 6, o sistema HLA se destaca por seu polimorfismo e por sua capacidade de conferir susceptibilidade ou proteção a diferentes enfermidades. Em Dermatologia, esse sistema desempenha papel importante na patogenia e história natural de várias doenças. A força e o tipo de associação variam com a dermatose e, algumas vezes, com o grupo étnico-racial estudado. O surgimento de métodos moleculares para tipificação dos alelos HLA e as recentes atualizações de sua nomenclatura têm contribuído para o melhor entendimento desse sistema. Infelizmente, essas informações não têm sido veiculadas de maneira adequada na literatura clínica, o que dificulta o entendimento da associação do HLA com as doenças cutâneas. Nesta revisão, são discutidos alguns aspectos do sistema HLA, métodos de detecção, nomenclatura e sua associação com vitiligo, pênfigo, psoríase, lúpus eritematoso, escabiose, leishmaniose cutânea, hanseníase, paracoccidioidomicose e dermatite atópica.

HLA class II polymorphism in Brazilian populations

A investigação da distribuição e freqüência dos genes HLA (Human Leukocyte Antigens) em populaçõespresumivelmente saudáveis é importante para avaliar a participação desses genes na susceptibilidadee proteção a doenças, para avaliar a origem genética das populações e para auxiliar na realização detransplantes. Os avanços na biologia molecular têm permitido um melhor entendimento desse sistema. Além disso, informações sobre as moléculas HLA de classe II, tais como seu mecanismo de ação, função e polimorfismo genético têm colocado esse sistema como marcador da composição das populações. Os genes HLA de classe II parecem ser associados a alguns grupos étnico-raciais mais que a outros. Usando essas características genéticas, é possível demonstrar, por exemplo, o grau de mistura de caucasianos, africanos e ameríndios que contribuem, de modo significante, para a origem da população brasileira, bem como esclarecer alguns aspectos da ancestralidade dessas populações, o que ajuda na realização de estudospopulacionais com o objetivo de obter informações sobre a história, formação, migração e composição de grupos populacionais de acordo com suas peculiaridades locais. Esse tema assume relevância em virtude da freqüência dos antígenos, alelos e haplótipos HLA de classe II na população brasileira.